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孔雀石绿检测

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       孔雀石绿是食品安全领域里继苏丹红以后在国际上引起轰动的又一高危物品,其具有高毒素、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用,因此,食品中孔雀石绿的现场检测技术成为食品安全领域的重点和难点。近日,一种新型检测技术的问世,将有效解决此问题。
 
       孔雀石绿是人工合成的有机化合物。其生产是由1摩尔分子的苯甲醛(Benzaldehyde)和2摩尔分子的二甲苯胺在浓盐酸混和下,加热缩合成隐色素碱(Leuco base),在酸性条件下加过氧化铅使其氧化,并在碱性液中沉淀出色素碱。它属于三苯甲烷型的绿色染料。
 
       孔雀石绿是一种带有金属光泽的绿色结晶体,又名碱性绿、严基块绿、孔雀绿,它既是杀真菌剂,又是染料,易溶于水,溶液呈蓝绿色,广泛用于真丝、羊毛、皮革、麻制品、陶瓷制品、棉布等的染色。孔雀石绿很早曾经作为杀菌剂、杀虫剂、消毒剂用于水产养殖业。长期以来,渔民都用它来预防鱼的水霉病、鳃霉病、小瓜虫病等,而且为了使鳞受损的鱼延长生命,在运输过程中和存放池内,也常使用孔雀石绿。鉴于孔雀石绿的危害性,许多国家都将孔雀石绿列为水产养殖禁用药物(观赏鱼除外)。我国也于2002年5月将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中,禁止用于所有食品动物。 
 
孔雀石绿的检测方法
        孔雀石绿在水生动物体内迅速代谢成无色孔雀石绿,而无色孔雀石绿的毒性甚至超过孔雀石绿,所以通常将孔雀石绿和无色孔雀石绿的总量作为动物源性食品中孔雀石绿残留的限量指标。孔雀石绿的检测方法以理化检测法和免疫学检测法为主。其中理化检测法包括:薄层层析法、分光光度法、 高压液相色谱法、液相色谱质谱联用法、气相色谱质谱联用法等,相较之下免疫学检测方法更为常用。
  酶联免疫检测法(ELISA):酶联免疫法的基本原理是将酶分子与抗体分子共价结合,结合产物不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。底物可在酶的作用下使其所含的供氢体由无色的还原型转变成有色的氧化型,出现颜色反应,颜色反应的深浅与样品中相应抗体或抗原的量呈一定的比例,显色反应可通过酶标仪进行定量测定。ELISA方法是一种特异、敏感的检测方法,可分为: 间接竞争抑制法、抗体/抗原包被直接竞争法和夹心法。
        其中间接竞争抑制法,是用人工抗原包被酶反应板后加入抗血清和待测药物进行竞争性结合反应,洗涤后板上只留有与包被抗原结合的抗体(一抗) ,再加酶标记物的二抗与一抗结合,洗涤后加入酶的底物。酶催化反应的产物量与被结合的一抗和二抗量呈正比,与待测样品中相应的药物量呈反比。其特点在于一个一抗可结合多个二抗,放大待测物的量,提高了方法的灵敏度。截至2013年的商品ELISA孔雀石绿试剂盒,都只能检测孔雀石绿总量,不能同时检测孔雀石绿和无色孔雀石绿各自的含量,在样品前处理过程中应注意根据抗原和抗体的类型,将目标化合物全部转化成相对应的形态。
       《水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》国家标准由国家标准委员会正式发布。这项标准的出台,将给中国水产品的养殖、生产、加工、消费、出口提供新的质量检测依据。由于孔雀石绿中含有致癌物质,所以包括中国在内的一些国家已宣布禁止其在经济鱼类(观赏鱼除外)养殖过程中使用。据悉,该标准可满足水产品中孔雀石绿和结晶紫残留的筛选以及疑似样品的确证。
 
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